副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种重要的食源性致病菌,人们食用受该菌污染的食物后会引起腹泻、呕吐等症状,甚至导致脱水、休克及死亡。目前,副溶血弧菌引起食物中毒的发生规模呈明显扩大趋势,已成为我国首要的食源性致病菌。因此,对副溶血弧菌进行常规调查,了解其分布、形态和类型以及发展新型副溶血弧菌检测方法就显得尤为重要。当前,虽然国内外已有采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测副溶血性弧菌的相关报道,但是仍存在成本高、耗时长、不稳定和易污染等不足,因此迫切需要一种新型的检测副溶血弧菌的方法。 目的:了解市售水产品中副溶血弧菌污染情况并建立简便、快速和灵敏的新型LAMP检测副溶血弧菌基因tlh、tdh和trh的方法。 方法:一、在食物中毒高发季节采集鱼、虾、贝、蟹及头足5类20种共161份样本,然后按照传统培养法和生理生化法进行副溶血弧菌分离和鉴定,之后采用普通PCR法检测副溶血弧菌的tlh基因进行验证,并对其毒力基因(tdh和trh)进行检测和分布统计分析,最后采用11种O群分群血清对分离到并验证的副溶血弧菌进行血清分群研究。二、针对副溶血弧菌种特异性基因-不耐热溶血毒素基因(tlh)的6个特异性位点设计1套LAMP引物,通过对反应体系(镁离子浓度、甜菜碱浓度、内外引物比及环引物加入与否)及反应条件(反应温度和反应时间)的优化建立副溶血弧菌的LAMP检测法,之后通过采用LAMP法检测74株实验菌评价其特异性,通过采用LAMP法检测梯度稀释的标准菌基因组DNA、纯培养的副溶血弧菌及贝类模拟样本评价其检测敏感性,并与普通PCR法检测敏感性对比分析评价其应用价值。三、针对副溶血弧菌种特异性基因-溶血毒素基因(tdh及trh)的6个特异性位点分别设计1套LAMP引物,采用新建的LAMP法体系和条件对74株食源性病原菌分别进行tdh和tlh基因的LAMP检测,观察其检测特异性并评价该方法的现场应用价值。 结果:一、通过传统方法分离和鉴定及PCR验证,161份样本中共检出副溶血弧菌45株,平均检出率为27.95%,不同种类水产品中V p的检出率有显著性差异(χ2= 11.20, 0.01

出生年月：1972年7月 籍贯：湖南省攸县

学历：研究生 学位：博士 职称：教授

教育及工作背景

1990.09~1994.07：湖南科技大学生物教育专业，本科，学士；

1994.09~1997.07：厦门大学微生物学专业，研究生，硕士；

2000.09~2003.10：厦门大学动物学专业，研究生，博士。

1997.07~2005.08：厦门出入境检验检疫局从事食品安全与生物检测技术应用研究工作。2004.06~2006.05：汕头大学基础医学博士后科研流动站做博士后。

2008.08~2009.03：美国农业部南方农业研究中心（新奥尔良市），访问学者

2005.08~ 至今：集美大学生物工程学院任教。

主讲课程

本科生：科技英语、食品营养与卫生学、营养与食品安全、现代食品安全科学

研究生：食品微生物学进展、食品生物技术

主要研究兴趣和方向

食品生物技术、水产食品加工、免疫生物学。 1．转基因作物及其食品的定量PCR检测体系研究，厦门市科技计划项目3502Z2001109，课题负责 人，立项年份2001，已通过验收鉴定。

2．空肠弯曲菌的磁捕获-荧光PCR检测技术研究，国家质量监督检验检疫总局重大项目2002IK002-06，课题负责人，立项年份2002，已通过验收鉴定。

3．海洋弧菌琼胶酶及其编码基因的研究，广东省自然科学基金项目06300998，课题负责人，立项年份2005，已通过验收。

4．鱼虾类水产食品主要过敏原的免疫检测与加工脱敏技术开发，福建省科技计划重点项目2006I0023，课题负责人，立项年份2006，已通过验收。

5．鱼虾类水产食品过敏原的监控技术研究，福建省自然科学基金项目2006J0419，课题负责人，立项年份2006，已通过验收。

6．水产食物过敏原的体外免疫检测技术，福建省科技计划项目2006F5064，技术负责人，立项年份2006，已通过验收。

7．食源性致病弧菌VBNC状态的快速检测技术研究，广东省科技计划项目20065060046，技术负责人，立项年份2006，已通过验收。

8．产蛋白酶极地海洋浮游细菌的系统发育多样性比较及其生理生态特征分析，国家自然科学基金项目40676002，子项目负责人，立项年份2006。

9．蟹类过敏原的免疫识别与酶法降解，国家自然科学基金项目30871947，课题负责人，立项年份2008。

10．鳗鱼加工新技术及产品安全监控体系，农业部项目nyhyzx07-043，子课题负责人，立项年份2007。

11．2007年度福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划，课题负责人，立项年份2007。 1. 一种检测空肠弯曲菌的方法（发明专利），专利号为ZL 2004 1 0051081.4。（2007.10授权，第一发明人）

2. 转基因产品的荧光双链探针定量PCR检测试剂盒（实用新型专利），专利号为ZL 2003 2 0124972.9。（2005.01授权，第一发明人）

3. 转基因产品的低密度基因芯片检测方法（发明专利），专利号为2004 1 0045458.5。（2007.01授权，第二发明人）

4. 检测水产品食物过敏原基因的实时荧光PCR方法（发明专利），申请号为200810071732.4，第一申请人

5. 检测水产品食物过敏的免疫胶体金层析方法（发明专利），申请号为200810071731.X，第一申请人

6. 生产海蟹调味料产品原料的方法（发明专利），申请号为200810071733.9，第一申请人

7. 转基因产品的表面等离子共振生物传感器检测方法（发明专利），受理号为200410045459.X，第二申请人。 （英文题目论文略）

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